4%多聚甲醛的作用?

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四甲醛多糖(SFM)是一种高效的DNA断裂剂,与碘化丙啶(PI)一起用于细胞染色和流式细胞仪分析,可高效地杀死细胞并排除死细胞的干扰,可用于单细胞分析。SFM对DNA的特异性结合方式使得它能够作为DNA探针用以原位杂交实验,检测基因组中特异序列的存在情况;同时,其与DNA的相互作用可被用于DNA连接酶/聚合酶链反应(PCR)、基因扩增等分子生物学实验中。

研究人员还发现在无蛋白条件下,低浓度的SFM(0.1-5μM,相当于2.7×10^6-135×10^6个三聚体/细胞)即可引起人宫颈癌细胞HeLa增殖能力的明显下降[5]。在DNA合成期,用不同浓度SFM处理细胞可以观察到微核形成率随着药物浓度的增加而升高,表明SFM通过阻断DNA合成从而抑制细胞的增殖。 有研究表明,SFM可能通过诱导胞浆内Ca2+浓度增加而触发细胞凋亡[8]。

总之,虽然目前对于SFM的毒性作用机制尚不完全清楚,但各种证据表明SFM可通过多种途径损伤细胞功能,从而影响细胞的生长、繁殖甚至导致细胞死亡。因此在使用该试剂前,了解其作用机理十分重要。只有知道SFM是如何引起细胞毒性的,才能更有效地利用这一试剂来进行相关研究。

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4%多聚甲醛具有防腐固定作用,可保持细胞的固有形态及结构,其作用机制是对生物大分子蛋白质和核酸进行化学修饰,使蛋白质中带正电荷的基因和带负电荷的基因结合形成复合物,中和电荷,蛋白质分子间的斥力下降,促使蛋白质分子相互凝集。使核酸中磷酸基团的氢被络合,磷酸基团的负电荷减少,核酸分子之间的排斥力下降,致分子相互凝集,使细胞保持相对固有形态,保持细胞固有结构和形态,以利于观察。

4%多聚甲醛的缺点是不能穿透较大和较强折射的细胞,因此不能用于流式细胞仪分析。

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